Molekulare Erkennung von Variola-Virus in Archivmaterial Pathologie Probe
Ein seltener, erhalten Muster menschlicher Gewebe infiziert mit Pocken-Virus, der Erreger der Pocken, hat die Wissenschaftler die einmalige Gelegenheit zu testen, modernen Diagnose-Möglichkeiten für das Virus.
Pocken, eine verheerende Krankheit, war im Jahr 1979 getilgt durch die Bemühungen der Weltgesundheitsorganisation (WHO). Derzeit infektiösen Pocken (einer Art der Gattung Orthopoxvirus) bekannt ist, gibt es nur in zwei WHO-Repositories sanktioniert, eine in Russland und den anderen an der Centers for Disease Control and Prevention in Atlanta.
Es gibt jedoch Bedenken, dass nicht offenbarte Bezug Bestände des Virus kann es - und da ihr Potential als biologische Bedrohung Agenten, die Verbesserung der Methoden zum Nachweis und zur Identifizierung sind eine hohe Priorität.
Laut einem Artikel in der neusten Ausgabe von Labor-Untersuchung, die Muster, die in der Studie war Teil einer privaten Sammlung archiviert an der Indiana University School of Dentistry. Die Universität
Untersuchung, die Probe - eine intakte Unterarm und Hand, vermutlich von einem Kind - zu etwa 50 Jahre alt. Es wurde angeboten, die US Army Medical Research Institute of Infectious Diseases (USAMRIID) für die weitere Analyse.
"Dies war eine einmalige Chance für uns, um alle Tests und Techniken, die wir gearbeitet hatten für einen potenziellen biothreat Agent - und tun es mit einem realen Beispiel einer Krankheit, die nicht mehr auf", sagte führen Autor Randal J . Schoepp.
Die USAMRIID Team enthalten Michelle D. Morin, Mark J. Martinez, David A. Kulesh, Lisa Hensley, Thomas W. Geisbert, und Peter B. Jahrling, mit Daniel R. Brady von der Indiana University als Beitrag zur der Studie.
Nach Schoepp, die dem Muster war eine Herausforderung. Es wurde erhalten weniger als ideale Lagerbedingungen, ausgesetzt extremen Temperaturen, und in Fixiermittel für Jahrzehnte. Dennoch bietet eine einmalige Gelegenheit, eine moderne, integrierte Diagnose-Ansatz für Pocken.
Die Autoren mit Routine-Histologie. Gewebeproben wurden, eingebettet in Paraffin-Blöcke, Abschnitten und auf Folien für die Prüfung. Die Läsionen in diesen Gewebeproben waren charakteristisch für poxvirus Infektion.
Weiter, Elektronenmikroskopie erlaubt dem Team, um die Struktur des Virus. Trotz der Zustand der Probe, dieser Analyse ergeben, leicht viralen Partikel mit einer poxvirus in verschiedenen Stadien der Replikation.
Zusammengenommen sind diese Ergebnisse zeigten, Primär-Pocken-Krankheit. Um das Vertrauen auf diese vorläufige Diagnose, die DNA extrahiert Team von Gewebeschnitten und getestet mit TaqMan? Assays. Diese Tests basieren auf einem Prozess, der Polymerase-Kettenreaktion oder PCR, kann in Echtzeit überwacht.
Real-time PCR TaqMan oder? Tests erfordern nur ein Fragment von genetischem Material, das verstärkt oft auf den Nachweis und die Identifizierung von einem biologischen Arbeitsstoff. Die Technik ist sehr empfindlich und vertragen können kleine Mengen von schlechter Qualität DNA, wodurch es ideal für diese Studie.
Der Test erlaubt die USAMRIID Team zu erkennen beide orthopox und Variola-Virus-DNA aus dem Festnetz Gewebeschnitten.
"Diese Arbeit ist ein weiteres Beispiel für den herausragenden Fähigkeiten, die sich auf USAMRIID - von der klassischen Pathologie Methoden zur State-of-the-art der molekularen Diagnostik", sagt Erik A. Henchal Oberst, Kommandeur des Instituts.
"Die Kombination dieser Werkzeuge in einem integrierten System, wie in USAMRIID Wissenschaftler, könnte sich die Art und Weise, dass biologische Arbeitsstoffe identifiziert werden."
USAMRIID, befindet sich in Fort Detrick, Maryland, ist die führende Labor für biologische Verteidigung der Medical-Research-Programm, und spielt eine wichtige Rolle in der nationalen Verteidigung und in Infektionskrankheiten Forschung.
Das Institut hat die Aufgabe, Grundlagenforschung und angewandte Forschung über die biologische Bedrohungen aufgrund der medizinischen Lösungen (z. B. Impfstoffe, Arzneimittel und Diagnostika), um die Warfighter. USAMRIID ist eine untergeordnete Labor des US Army Medical Research und Materiel Command.
Kontakt: Caree Vander Linden
Caree.Vander-Linden @ amedd.army.mil
301-619-2285
US Army Medical Research Institute of Infectious Diseases